laebio K007说明书

laebio K007说明书

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

描述：
该检测试剂盒含有用于常规检测SUMO化活性的试剂。包括Sumoylation标记（人拓扑异构酶I蛋白）以允许清楚地检测反应。已经证明该测定法适用于粗提物。强烈建议将人类EI，活性物质（Cat＃P001; P006），人类E II，活性物质（Cat＃P002; P011）和人类SUMO I，活性物质（Cat＃P003; P012）与此试剂盒一起使用。

K007套件包含：

• SAE I和SAE II（人类EI）（Cat＃P006）
• UBC9（人类E II）（Cat＃P011）
• SUMO I（活动形式）。（Cat＃P012）
• 人DNA拓扑异构酶I片段。（Cat＃B007）
• 抗拓扑异构酶I抗体。（Cat＃AP006）（冻干的抗体应在使用前用100ul H ₂ O 重构。）
• 10X的SUMO化反应缓冲液。（Cat＃B006）（10x缓冲液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl ₂和20mM ATP。）

上述试剂适用于50次SUMO化反应。

测定条件：
SUMO化测定在20微升的终体积中含有20mM的Hepes pH为7.5，5mM的氯化镁反应缓冲液中进行₂，2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I Sumoylation Control Protocol：

1. 加入2ul 50kd拓扑异构酶I片段（Cat＃B007）作为每个反应的底物。
2. 在每个反应中，首先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反应缓冲液（Cat＃B006），2ul E1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使总体积达到20μl 。
3. LAE SUMO化蛋白的宜反应浓度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml
         为对照测定的推荐条件是37 ^ø 30〜60分钟c。。
    
4. 在10 ml（Cat＃AP006）中使用1000倍稀释的提供的拓扑异构酶I抗体进行免疫印迹。应检测四个主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗体（cat＃AP006）的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白（cat＃B007）的Western印迹（12.5％凝胶）。泳道1：sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2：未经过酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗体（ Cat＃AP006）可检测至少四个主要的SUMO化Topo-1片段 。

Sumoylation Protocol：

1. 准备合适的纯化底物蛋白。
2. 在每个反应中，首先向底物中加入2μlE2，然后加入2μlSy,2μl10μl反应缓冲液，2μlE1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使终体积达到20μl。
3. LAE蛋白的宜反应浓度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml

运输/储存：
此套件随附干冰，应储存在-70 ^o C或更低温度。  

法律考虑：仅供研究使用。

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Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

描述：
该检测试剂盒含有用于常规检测SUMO化活性的试剂。包括Sumoylation标记（人拓扑异构酶I蛋白）以允许清楚地检测反应。已经证明该测定法适用于粗提物。强烈建议将人类EI，活性物质（Cat＃P001; P006），人类E II，活性物质（Cat＃P002; P011）和人类SUMO I，活性物质（Cat＃P003; P012）与此试剂盒一起使用。

K007套件包含：

• SAE I和SAE II（人类EI）（Cat＃P006）
• UBC9（人类E II）（Cat＃P011）
• SUMO I（活动形式）。（Cat＃P012）
• 人DNA拓扑异构酶I片段。（Cat＃B007）
• 抗拓扑异构酶I抗体。（Cat＃AP006）（冻干的抗体应在使用前用100ul H ₂ O 重构。）
• 10X的SUMO化反应缓冲液。（Cat＃B006）（10x缓冲液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl ₂和20mM ATP。）

上述试剂适用于50次SUMO化反应。

测定条件：
SUMO化测定在20微升的终体积中含有20mM的Hepes pH为7.5，5mM的氯化镁反应缓冲液中进行₂，2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I Sumoylation Control Protocol：

1. 加入2ul 50kd拓扑异构酶I片段（Cat＃B007）作为每个反应的底物。
2. 在每个反应中，首先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反应缓冲液（Cat＃B006），2ul E1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使总体积达到20μl 。
3. LAE SUMO化蛋白的宜反应浓度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml
         为对照测定的推荐条件是37 ^ø 30〜60分钟c。。
    
4. 在10 ml（Cat＃AP006）中使用1000倍稀释的提供的拓扑异构酶I抗体进行免疫印迹。应检测四个主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗体（cat＃AP006）的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白（cat＃B007）的Western印迹（12.5％凝胶）。泳道1：sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2：未经过酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗体（ Cat＃AP006）可检测至少四个主要的SUMO化Topo-1片段 。

Sumoylation Protocol：

1. 准备合适的纯化底物蛋白。
2. 在每个反应中，首先向底物中加入2μlE2，然后加入2μlSy,2μl10μl反应缓冲液，2μlE1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使终体积达到20μl。
3. LAE蛋白的宜反应浓度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml

运输/储存：
此套件随附干冰，应储存在-70 ^o C或更低温度。  

法律考虑：仅供研究使用。