swant 300说明书

产品名称：钙结合蛋白D28K小鼠单克隆抗

英文名称：Monoclonal anti Calbindin D-28k

货号： 300

批号：07 (F)

外观：冻干粉.

      溶解：200 µl / 500 µl 或 1 ml 双蒸水

规格：

产品描述：

钙结合蛋白 D-28k单克隆抗体是将小鼠骨髓瘤细胞与来自肠道[1]的钙结合蛋白-28k免疫小鼠脾细胞杂交产生的小鼠IgG1。钙结合蛋白D-28k的单克隆抗体（McAB），是EF-hand家族与钙调素和肌钙蛋白C相关的钙结合蛋白。

反应种属：

WB：人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和鸡。

经WB免疫印迹验证McAB 300（钙结合蛋白 D-28k）能测除鱼以为的人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和鸡的组织提取物（见图1）。并且不与钙网膜蛋白及其他钙结合蛋白产生交叉反应。凝胶电泳显示McAB 300（钙结合蛋白 D-28k）特异性结合位点为D-28k（MW 28'000，IEP 4.8）。放射免疫法检测钙结合蛋白D-28k，灵敏度为10ng/反应，亲和力为1.6x 10¹² L/M。

经测试应用：

WB, IHC-P/Fc, IF-P/Fc，ELISA，RIA

WB： 免疫印迹； IHC ：免疫组织化学；IF：免疫荧光，ELISA：酶联免疫；RIA：放射免疫

以下方法厂家已用于验证抗体的特异性和效价评价：（a）免疫组化/免疫荧光（HRP或生物素-亲和素标记法检测4%多聚甲醛固定的冰冻组织切片/石蜡组织切片；（b）免疫印迹WB/ELISA；（c）放射免疫分析。

稀释比例

免疫组化： 1:5'000 - 1:10'000 生物素标记法。

WB： 1:100 - 1:1'000 （HRP）。

建议根据实验内容选择合适的方法。

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储存：

短期保存：- 20°C，长期保存：- 80°C，近期频繁使用保存于 4°C (增加0.01% 叠氮钠)。避免反复冻融。建议分装小份储存。

特异性表达：

免疫组织化学染色表明钙结合蛋白 D-28k特异表达在所有脊椎动物（鱼类除外）的脑、肾和胰腺的组织切片（漂片/贴片法）

脑组织提取物WB 检测

1 2 3 4 5 6 7

28 Kda

图1 ：不同种属脑组织匀浆液的WB检测结果。上样顺序依次为：1 小鼠；2 大鼠；3 豚鼠；4 兔子；5 食蟹猴；6 斑马鱼；7 重组钙结合蛋白D-28k。WB结果表明，在所有物种中（斑马鱼除外），仅特异检测到28kDa的条带。

钙结合蛋白D-28k基因敲除小鼠的免疫组织化学（IHC）研究

CB300（钙结合蛋白 D-28k）于正常脑组织的神经元高表达（图2a）而在钙结合蛋白D-28k基因敲除小鼠脑组织的相同区域未见阳性表达（图2b）。

参考文献

1. Celio M.R. et al., Cell Calcium 11:599-602, 1990
2. Kretsinger R.H. (1981) Neurosci. Res. Progr. Bull. 19/8, MIT-Press
3. Garcia-Segura L.M. et al. (1984) Brain Rews. 296: 75-86.
4.  Airaksinen M.S., et al, (1997), PNAS 94(4) : 1488-1493