jembio末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT说明书)

jembio末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT说明书)                jembio末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT) 是一种不依赖模板的聚合酶，它催化将脱氧核糖核苷酸单磷酸从三磷酸盐添加到 DNA 的 3' 羟基末端。 描述：• 优选的底物是：单链DNA、带有3'-羟基末端的双链DNA和寡脱氧核苷酸引物(1)。• 用于用核糖核苷酸对 3'-末端进行特异性标记 (2)。• 用[a-32P] 3'-脱氧核苷(3) 标记DNA 片段的3'-末端。• 将脱氧核糖核苷酸的均聚物尾部添加到载体或 cDNA (4,5)。单位定义：一个单位定义为在 37°C 下 1 小时内将 1 nmol dAMP 从 dATP 转移到寡脱氧核糖核苷酸引发剂 p(dA)50 的 3'-OH 末端所需的酶量。 储存条件：储存于-20°C。 储存缓冲液：100 mM Tris-HCl（22°C 时 pH 7.2）、1 mM 二硫苏糖醇和 50% (v/v) 甘油。 检测条件：40 mM 二甲胂酸钾 (pH 7.2)、8 mM MgCl2、8.3 mM 磷酸钾、0.33 mM ZnSO4、10 mg/ml 牛血清白蛋白、0.01 mM 寡脱氧核苷酸 p(dA)50 和 1 mM [a-³²P]dATP在 37oC 下 1 小时内，反应体积为 60 µl。 质量控制：所有制剂都经过核酸内切酶、核酸外切酶和非特异性 RNase 以及单链和双链 DNase 活性测试。